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当前位置：首页 > 产品中心 > 生物&化学试剂 > Western Blot实验相关试剂 > PMK003、PMK0448、 PMK0575ECL发光底物检测试剂盒（Western Blot）
详细介绍
| 品牌 | 普美生物 | 货号 | PMK003、PMK0448、 PMK0575 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 100ml/500ml | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 发光底物检测 | 应用领域 | 综合 |
一、产品规格
产品名称：ECL发光底物检测试剂盒（Western Blot）
品牌：普美生物
货号：PMK003、PMK0448、 PMK0575
规格：100ml/500ml
二、产品基本介绍
ECL发光底物检测试剂盒（Western Blot）
PMK0575：极超敏ECL发光底物检测试剂盒（阿克级）
极超敏 ECL 发光底物检测试剂盒用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP 的抗体及其关联的抗原，是一种可广泛应用于免疫学实验的化学发光试剂。由于采用了发光底物系统和高灵敏度荧光 ECL 发光试剂，极超敏 ECL 发光底物检测试剂盒是目前灵敏的商业化荧光 ECL 检测试剂之一，灵敏度高于常规超敏ECL 检测试剂数千倍乃至数万倍：(1) 具有灵敏度和高信噪比，可检测 10～100ag 微量抗原；(2) 发光迅速且稳定，荧光可使 X 光胶片感光达 12 小时以上，特别适用于痕量蛋白或核酸检测；(3) 可使用更高的抗体稀释倍数(1:2000～1:20000) ，极其节省抗体。(4)优异的性价比，更高的性能，更低的价格。
使用方法：
(1) 使用合适的方法进行 Western Blot ，直至用 PBST 洗涤二抗。注意用 HRP 标记 IgG 或用一抗-链亲和素-Biotin-HRP 夹心法。
(2) Western Blot 后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液：分别取等体积的溶液 A 和 B ，放入干净容器中混合备用。工作液宜在临检测前配制，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。
(3) 用 WB 专用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜干燥。将膜置于一洁净保鲜膜上，然后使其 浸入新配制的发光工作液(0. 1mL 发光工作液/cm2 膜)中充分接触，室温孵育 2 分钟。孵育时间过长不会 增加灵敏度，有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应，使用过少的发光工作液不利反应进行，也会导致膜上条带曝光不均和明显的灵敏度降低，为达节约目的可将膜剪小但勿降低发光液用量。
(4) 用 WB 专用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液，但勿洗去发光液。将膜放在两片保鲜膜中间，随后进行压片检测或化学发光成像仪检测。
(5) 压片检测：将 Western Blot 膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来包裹 Western Blot 膜，去除气泡和皱 褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。将覆盖 Western Blot 膜的保鲜膜固定在暗 盒内，蛋白带面向上。打开 X 光胶片暗盒，暗房内压 X 光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟，然后定影显影冲洗。后根据结果再调整压片时间得到满意的压片结果。
(6) 化学发光成像仪检测：将膜放置到化学发光成像仪内，参考仪器说明书进行检测。
注意事项：
(1) 各溶液使用完后，请盖紧瓶盖以防失效。特别是 B 液，含有氧化剂，比较容易被还原而失效。
(2) A 液和 B 液在吸取过程中必须要更换枪头，A 液和 B 液相互污染后会导致 A 液和 B 液逐渐失效，影响后续的使用效果。
(3) 步骤 1～4 可在日光灯下操作；但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低，移到暗房操作可避免之。
(4) 长时间曝光或蛋白过量，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系；曝光不足则条带模糊。
(5) 发光工作液孵育约 2 分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见，低丰度蛋白条带发光较弱甚 至肉眼不可见但可使 X 光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间，肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使 X 光胶片感光，因而弱带可曝光 1- 10 小时。
(6) 由于极超敏发光液极其灵敏，强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗 1:2000～1:20000 ，二抗 1:10000~1:100000 。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带导致失败。
(7) 当发现极超敏 ECL 发光底物检测试剂盒(PMK0575)的检测灵敏度过高而影响检测结果时，可以选择检测灵敏度较低一些的特超敏 ECL 发光底物检测试剂盒(PMK003)或超敏 ECL 发光底物检测试剂盒(PMK0448)，或者减少样品、一抗或二抗的用量。
(8) 某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜。尽量使用 WB 专用镊子或者塑料镊子，金属镊子可能会造成淬灭荧光。
(9) NaN3 能抑制 HRP 活性，因此缓冲液中应避免使用 NaN3 做为防腐剂，如必需使用勿超过 0.01%。
(10) 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
(11) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作，且戴手套可以避免在印记膜上留下手印。
PMK0448：超敏ECL发光底物检测试剂盒（飞克级）
普美克生产的超敏ECL发光底物检测试剂盒用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶（HRP）的抗体及其关联的抗原。其原理是，蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上，以一抗及HRP标记的二抗结合膜上的目的蛋白，或以HRP标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后用本产品配制的ECL工作液，室温孵育膜数分钟，将印迹膜用保鲜膜包被粘贴固定于X光片曝光暗盒。然后转入暗室将X光胶片压在膜上曝光数秒到数小时，显影定影后蛋白质或核酸条带可清晰显示在X光胶片上。
本产品采的发光底物系统，降低曝光背景的同时引入新型的氧化剂，大大提高试剂盒的稳定性，使其在室温能稳定放置一年。本产品配制的ECL工作液衰减较慢，15min内荧光几无减弱，检测时产生的非特异背景非常低，也可节省抗体和待测样品的用量，该试剂可用于PVDF膜和NC膜(硝酸纤维素膜)的Western blot免疫印迹等印迹发光显色。除用于X光胶片，还可直接使用荧光CCD扫描。
注意事项：
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、本产品A液和B液均对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护避免直接接触人体或吸入体内。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
PMK0575：特超敏ECL发光底物检测试剂盒（低阿克级）
特超敏ECL发光底物检测试剂盒用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原，是一种可广泛应用于免疫学实验的化学发光试剂。由于采用了的发光底物系统和高灵敏度荧光ECL发光试剂，特超敏ECL发光底物检测试剂盒是目前灵敏的商业化荧光ECL检测试剂之一，灵敏度高于常规超敏ECL检测试剂数十倍乃至数百倍：
1、具有灵敏度和高信噪比，可检测10～100fg微量抗原；
2、发光迅速且稳定，荧光可使X光胶片感光达12小时以上，特别适用于痕量蛋白或核酸检测；
3、可使用更高的抗体稀释倍数(1:5000～1:20000)，极其节省抗体。
4、优异的性价比，更高的性能，更低的价格。
注意事项：
1、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作，且戴手套可以避免在印记膜上留下手印。
三、品牌介绍
湖北普美生物科技有限公司成立于2022年，专注于生命科学领域的产品研发、生产与销售。公司以“创新驱动、品质为先"为理念，致力于为科研人员提供高品质的科研工具和技术支持，助力生命科学研究的发展。依托的科研团队和创新的生产技术，截至目前，公司已发表学术论文千余篇，拥有自主知识产权的超过百项。普美生物建立有的生产和质控体系，确保产品质量稳定可靠。公司主要产品涵盖了分子生物学、细胞生物学、免疫学及生物化学等多个领域，满足不同科研需求。此外，普美生物还积极与高校和科研机构合作，共同推动前沿技术的转化与应用。展望未来，湖北普美生物将继续秉持“为科学家提供可信赖的科研工具"的宗旨，力求成为生命科学领域的企业。我们期待与*的科研机构和合作伙伴携手并进，共同为人类健康与生命科学的进步贡献力量。
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