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红细胞裂解液的取用规则和注意事项

发表时间:2022-06-12  |  点击率:207
   红细胞裂解液主要包括植物、动物、微生物基因组DNA的提取与鉴定,哺乳动物组织总RNA的提取与鉴定,质粒DNA的提取与鉴定,PCR扩增,分子杂交技术,限制性内切酶消化,分子克隆全过程和基因文库的构建等实验项目的原理及步骤。经过过滤灭菌处理,主要用于流式细胞分析时,裂解液和组织中的红细胞。也可以用于核酸纯化时裂解红细胞。
 
  红细胞裂解液的取用规则:
  (1)试剂不能与手接触。
 
  (2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,方可取用另一种试剂。
 
  (3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后将瓶放回原处
 
  (4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。
 
  红细胞裂解液的注意事项:
  1、制备细胞悬液时应根据实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。
 
  2、后续试验如果是用于细胞培养,操作过程中应注意无菌操作,尽量在超净工作台内操作。
 
  3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。
 
  4、常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程,洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
 
  5、离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
 
  6、如果经过处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液,即无需在该操作中特意去除RNase。
 
  7、为了安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。